介绍一篇文章“GalNAc-Lipid nanoparticles enable non-LDLR dependent hepatic delivery of a CRISPR base editing therapy “在这篇文章中,该课题组优化了GalNAc脂质纳米颗粒，该纳米颗粒允许低密度脂蛋白受体非依赖性递送。通过研究发现，GalNAc-Lipid纳米颗粒可以有效地递送给具有完整低密度脂蛋白受体活性的患者以及纯合子家族性高胆固醇血症患者。

对于一系列重要疾病，脂质纳米颗粒（LNP）已成为肝脏递送的首选策略。由内源性 ApoE/LDLR 结合介导的肝脏 LNP 摄取可以使用多价 N-乙酰半乳糖胺 （GalNAc） 靶向配体，该配体允许通过去唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）途径摄取。GalNAc-LNP方法以前没有在基因组编辑医学的背景下被描述过，但这种方法已被证明可用于其他治疗技术的肝脏递送，因此他们合理设计并开发能够通过LDLR非依赖性途径提供CRISPR碱基编辑治疗的GalNAc-LNP，并且应用在野生型非人灵长类和新开发的LDLR缺陷型非人灵长类模型上。

由于在多价配体设计中，糖部分的接近和束缚对于有效识别和结合ASGPR至关重要，从而促进肝细胞的摄取，因此他们将三个GalNAc单元共价连接到两个不同的支架上，获得了配体设计1和设计2，其中设计2是基于赖氨酸的支架，以共价连接三个糖单元和脂质锚，而设计1利用了TRIS支架。

图1

通过系统地设计和筛选各种GalNAc-脂质，他们确定了一种能够对ANGPTL3基因进行有效CRISPR碱基编辑的配置和LNP制剂。较长的PEG间隔区比较短的间隔区更有效；由较长的间隔物提供的更大的运动范围和与颗粒的距离可以提高成功的ASGPR结合的可能性。DSG脂质锚也优于其他锚结构，表明它优化了在颗粒上的停留时间，并且不干扰内体逃逸。之后发现在LNP颗粒形成之前通过将GalNAc-脂质与其他脂质赋形剂混合来配制GalNAc-LNP，可以产生稳定的颗粒，他们优化有效ASGPR识别所需的GalNAc配体的表面密度，来增加ASGPR介导的GalNAc-LNP摄取。最后他们在食蟹猴非人灵长类动物（NHP）模型中进一步评估优化的GalNAc-LNPs通过非LDLR依赖性途径有效递送靶向ANGPTL3的CRISPR碱基编辑药物。

图2

作者：YXQ

责编：FJY

原文链接; https://doi.org/10.1038/s41467-023-37465-1