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分享一篇来自于ACS Chemical biology的文章，题名为“Radical-Mediated Covalent Azidylation of Hydrophobic Microdomains in Water-Soluble Proteins”。
通常向蛋白质中引入叠氮基团的方法包括：在细胞中使用翻译产物中含有叠氮残基的mRNA、使用叠氮化物试剂对特定位点修饰、使用重氮转移将伯胺衍生为叠氮化物。在本文中作者开发了一种简便的可以将叠氮阴离子结合到可溶性蛋白的疏水区域，然后通过质谱法捕获和鉴定的方法。使用的试剂b、c所示，在H2O2作用下向蛋白质残基引入叠氮基团，通过click反应引入biotin进行蛋白质富集，最后进行质谱分析。 作者使用溶菌酶对该方法进行验证，对H2O2和叠氮化物的浓度进行优化，并验证了发生叠氮化的位置。
最后作者使用该方法鉴定拟南芥细胞裂解物叠氮结合位点，质谱数据分析显示其具有鉴定相应产物的功能，并分析了叠氮基团与过氧化氢酶之间的作用力。
本文作者:WWZ 责任编辑：FC https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acschembio.3c00224?fig=abs1&ref=pdf DOI：10.1021/acschembio.3c00224
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