给大家分享一篇发表在JACS上的文章：Thioamide Analogues of MHC I Antigen Peptides，通讯作者是威斯康星大学麦迪逊分校化学系的Samuel H. Gellman教授，他的课题组主要聚焦于研究天然蛋白质并创造新的折叠体分子。在这篇文章中，作者将用硫酰胺修饰多肽的策略应用在MHC I抗原肽上。
与MHC I抗原表位结合的合成肽可以诱导抗原特异性CD8 T细胞反应，因而这种多肽具有开发成为疫苗的潜力。然而含有L-α-氨基酸残基的短肽极易被蛋白酶切割，这限制了多肽疫苗的开发。目前还没有多肽抗原的修饰策略能够在保留MHC I识别特性的同时，减少蛋白酶的切割。于是作者尝试了用硫酰胺取代多肽主链酰胺的修饰策略。作者选取了可以与人类白细胞抗原-A2（HLA-A2）结合的，源自甲型流感病毒M1蛋白的高度保守的免疫显性表位GIL，构建了这一多肽的不同单取代硫代抗原。
首先，作者希望测量硫代抗原稳定T2细胞表面HLA-A2的能力，于是作者利用荧光标记的抗HLA-A2抗体，通过流式细胞术定量测定细胞表面的多肽+HLA-A2（pHLA-A2）复合物的含量。结果显示，大部分单取代硫代抗原都具有与天然抗原相当或更高水平的与HLA-A2结合的能力。其次，作者利用CD8 T细胞识别T2细胞展示的pHLA-A2复合物，通过ELISA测定分泌的IFN-γ水平，量化T细胞的免疫反应。结果显示，尽管所有单取代硫代抗原都可以刺激CD8 T细胞分泌IFN-γ，但效果都要略微弱于天然抗原。然后，基于单取代硫代抗原的T细胞活化实验结果，作者设计了几种多取代硫代抗原，发现它们具有与天然抗原相当的与HLA-A2结合的能力，以及比天然抗原更高的活化T细胞的能力。
最后，作者利用蛋白酶K测试了多取代硫代抗原对酶切的敏感性。结果显示，1,5,8-取代的GIL的半衰期显著增加。相比之下，1,4,8-取代的GIL的半衰期则没有明显变化，说明在特定位置的硫酰胺取代可以起到对多肽整体的水解保护作用。此外，作者还选取了源自黑色素瘤抗原A蛋白的免疫表位ELA进行了相同的单取代和多取代抗原的构建，以及对HLA-A2结合能力、T细胞活化能力，以及蛋白酶K水解半衰期的测试。总的来说，这篇文章中作者利用硫酰胺取代酰胺的多肽修饰策略，在降低多肽对蛋白酶水解的敏感性的同时，保持了HLA-A2对抗原肽的识别能力和抗原肽+HLA-A2复合物对T细胞的激活效果。原文链接：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.3c05300文章引用：10.1021/jacs.3c05300
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