介绍一篇来自“Angewandte Chemie International Edition”的文献，题名为“Ultrafast Detection of Monoamine Oxidase A in Live Cells and Clinical Glioma Tissues Using an Affinity Binding-Based Two-Photon Fluorogenic Probe”。

单胺氧化酶 A (MAO−A) 的异常表达与人类神经胶质瘤的发展有关，这使得 MAO−A 成为有希望的治疗靶点。因此，快速测定 MAO−A 对于诊断至关重要。通过双光子荧光团的计算机筛选，作者发现N,N-二甲基萘胺（pre-mito）的衍生物可以有效地融入MAO−A空腔。结果表明，优化基于亲和结合的荧光探针可显着提高其检测率，为快速检测探针设计和优化提供通用方法。

作者设计并合成了一种基于亲和力结合的 TPFP ( CD1 )，用于快速检测人胶质瘤细胞和组织中的 MAO−A 含量。作者通过吡啶-N连接三个不同的取代基，基于pre-mito设计了三个探针 ( CD1-3 ) 。此外，吡啶可以增强线粒体靶向能力。作者首先使用分子对接评估了 CD1-3 与 MAO−A的结合亲和力（图2A）。对接结果表明CD1可能是结合MAO-A的理想的基于亲和力结合的探针。作者对所有三种探针进行了时间依赖性荧光分析，结果表明CD1与 MAO−A 的相互作用在 20 秒内完成（图 2B），这是迄今为止最快的 MAO−A 检测。CL的存在不会影响CD1对 MAO−A 的反应，从而证明CD1对 MAO−A的反应独立于CL结合位点，即酶促反应位点（图2D）。

图1

图2

共聚焦成像显示CD1处理的野生型SH-SY5Y中有清晰的荧光信号。此外，在CD1处理的 HepG2 MAO−A POE 中检测到强荧光信号（图4A和 B）。通过蛋白质印迹进一步证实了每个细胞系中MAO−A的细胞水平（图 4C），证明CD1可以选择性地检测活细胞中的内源性MAO−A。如图 4D和 E 所示，CD1有效地实现了深部肿瘤组织中 MAO−A 的成像，而在处理过的癌旁组织中检测到明显较弱的荧光信号。这些结果表明CD1具有良好的组织成像能力，可用于快速检测胶质瘤中MAO−A的含量，具有区分肿瘤与癌旁组织的潜力。

图3

总之，通过计算机筛选和合理设计，作者成功发现了一种优异的基于亲和力结合的TPFP（CD1），用于MAO−A的快速检测。高选择性与TICT效应的结合产生了超快的MAO−A荧光探针，具有高特异性和低检测限。CD1可作为快速临床诊断和术中图像指导中快速筛查 MAO−A 水平的潜在分子工具。

本文作者：QHJ

责任编辑：FJY

原文链接：https://doi.org/10.1002/ani.202310134

DOI: 10.1002/anie.202310134