抗生物素技术的应用多种多样，包括非放射性免疫分析法检测蛋白质、细胞化学染色、细胞分离、核酸分离、杂交法检测特异DNA/RNA序列以及离子通道构象变化的探测。

不同结构的生物素修饰单体根据在寡核苷酸内修饰位置的不同有各种应用，选择哪种结构的生物素修饰单体取决于需要标记的位置。

生物素-CE磷酰胺修饰单体（如图1所示）基于1,3-二醇结构，其中一个羟基用DMTr保护，另一个是磷酰胺，因此在寡核苷酸的3'或5'端均可添加生物素。

图1

有人认为，这种特性可以在诊断探针的开发中加以利用，例如在信号放大通常是有益的ELISA应用中。

生物素TEG-CE磷酰胺修饰单体（如图2所示）可以用与生物素-CE磷酰胺修饰单体类似的方法将生物素添加到寡糖的3’-或5’-端。其优点是这种修饰单体延长的连接臂将生物素与寡聚体的其余部分间隔开，可以减少空间位阻效应，例如，当使用大分子（例如半抗原、染料或酶）进行双重标记时，可以有效降低空间位阻的影响。

图2

5’-生物素CE磷酰胺修饰单体（如图3所示）可用于向低聚物中添加生物素，但仅能添加到寡核苷酸5’-端。

图3

在寡核苷酸序列内部添加生物素需要使用生物素dT-CE磷酰胺修饰单体（如图4所示），可以将寡核苷酸序列内任何位置的dT用生物素dT取代。修饰单体上的叔丁基苯甲酰基用于增加溶解性和保护生物素，在氢氧化铵脱保护步骤中被去除。

图4

原创 秦龙

参考文献：

1. S.J. Harper, E. Bailey, C.M. McKeen,A.S.Stewart, J.H. Pringle, J. Feeholly and T. Brown, J. Clinical Pathology, 50,686-690, 1997.

2. D.M. Whitely, G.M. LeCornec, A. Baddeley, J.Savill, M.W. Syrmis, I.M. Mackay, D.J. Siebert, D. Burns, M. Nissen andT.P.Sloots, Parasitology, 49, 25-29, 2004.