分享一篇发表在Nature Chemistry上的文章:Diazobutanone-assisted isobaric labelling of phospholipids and sulfated glycolipids enables multiplexed quantitative lipidomics using tandem mass spectrometry,通讯作者是威斯康星大学麦迪逊分校的李灵军教授,她的研究方向包括定量质谱策略和神经肽比较研究等多个领域。在这篇文章中,作者开发了一种对磷脂和硫酸化糖脂进行同位素标记的定量脂质组学方法。脂质组学是一个快速兴起的领域,然而由于脂质在结构和性质上的多样性,应用于脂质组学的高通量定量方法落后于基因组学和蛋白质组学,目前脂质的定量仍主要依赖于无标记方法。因此作者希望将基于同位素标记的定量策略引入脂质组学中,对磷脂和硫酸化糖脂进行定量分析。作者首先设计了一种重氮丁酮化合物,其中包含与磷酸或硫酸反应的重氮和用于后续同位素标记的羰基。该化合物具有挥发性,可以简化标记后的纯化步骤,并且羰基位于重氮基团旁边,可以稳定重氮的反应性。在氟硼酸(HBF4)催化下,重氮丁酮与磷脂或硫酸化糖脂发生O-烷基化反应,引入羰基,随后利用aminoxyTMT同位素标签进行羰基特异性的同位素标记。随后,作者利用脂质标准品对同位素标记方法进行了验证。在LC-MS/MS中,标记后的脂质显示出与原始脂质不同的MS2碎裂模式,可以通过碎片离子区分母离子的脂质类别。为了评估该方法的定量性能,作者分析了不同量的脂质标准品产生的aminoxyTMT报告离子信号强度,其与脂质总量之间有很好的相关性,并且不同通道标记的脂质在保留时间上没有明显的偏移。为了证明同位素标记方法对复杂生物样品的实用性,作者对肥胖小鼠的肝组织中的脂质进行了分析。在结果中一共鉴定到198种磷脂,三次重复显示方法的重复性较好。通过将不同通道标记的样品按一定比例混合,以及按一定比例添加氘代标准品的方式,作者也说明了该方法在复杂生物样品中同样具有优异的定量性能。最后,作者将方法应用于对健康瘦小鼠和胰岛素抵抗的肥胖小鼠的肝组织磷脂的六重定量分析。总的来说,这篇文章开发了一种基于重氮丁酮对含有磷酸和硫酸基团的脂质进行同位素标记和定量分析的策略。本文作者:LCX责任编辑:ZF原文链接:https://www.nature.com/articles/s41557-023-01436-2文章引用:10.1038/s41557-023-01436-2
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