邻近标记技术近年来被广泛用于细胞相互作用研究，其原理一般是在诱饵细胞上安装催化剂，当诱饵细胞和猎物细胞发生相互作用时，诱饵细胞上的催化剂使外源添加的反应性标签连接在猎物细胞表面相互作用位点附近的生物分子上，从而反映相互作用的空间信息。

然而，这些技术对外源标签的依赖使标记受限于标签本身的扩散特性，难以在有生物屏障的情况下进行准确报告。

近日，南京大学丁霖教授团队提出了可以原位生成标签的邻近标记技术，用于记录细胞间的相互作用事件，并将技术命名为GalTag。该技术将半乳糖氧化酶（GAO）锚定在诱饵细胞表面，该酶以哺乳动物细胞表面广泛存在的半乳糖/乙酰半乳糖胺（Gal/GalNAc）为底物，可以在相互作用发生时在猎物细胞表面原位生成反应性的醛基标签。因此，诱饵细胞具有“随走随标”的特点，不受外源标签在生物体系内扩散和局部积累不均的影响，使我们可以获得诱饵细胞在生物实体组织内的完整足迹信息。

作者首先在细胞层面验证了GalTag跨细胞标记的可行性和反映相互作用趋势的能力。猎物细胞表面月牙形的绿色荧光信号展示了其与诱饵细胞曾经相互作用的位点。

卡介苗（Bacillus Calmette-Guérin, BCG）灌注是经典的膀胱癌临床治疗方法。作者将GAO锚定在BCG菌表面，分别在正常和荷瘤小鼠上执行了膀胱灌注。对灌注后小鼠膀胱的组织切片进行醛基荧光染色后，可以发现标记信号深入膀胱上皮组织，深度与侵入的BCG一致，证实了GalTag记录实体组织中诱饵细胞完整足迹的能力。

在该工作中，丁霖教授团队基于半乳糖氧化酶提出了“原位生成标签”这一邻近标记技术的新理念，首次在活体上实现了实体组织内的细胞相互作用记录，为细胞相互作用研究提供了有力的工具。