给大家分享一篇angew上的文章Site-Specific Protein Modificationwith Reducing Carbohydrates，本文通讯作者是来自南开大学的轩维民教授与来自北京大学医学部的董甦伟教授，其课题组研究方向分别为基因密码子扩展、生物探针、蛋白质修饰、大分子药物开发；化学合成糖肽及糖蛋白的新方法和策略的发展和研究等。
糖基化在真核细胞蛋白中在分子识别、免疫等方面发挥了重要的作用。目前酰肼与糖的还原性末端发生的连接反应无需金属催化，成键在生理条件下稳定，原料易得，引起了广泛的关注，但此方法目前仅用于小分子与小肽段上。作者本文中将丙氨酸-β-酰肼（Aβz）合成到蛋白上，并以此构建大量种类的糖蛋白。
作者首先使用非天然氨基酸插入的方法将L-天冬氨酸β-苄酯（BnD）插入改造后的GFP上，之后与肼反应，可将BnD完全转化为Aβz，再在弱酸性条件下与GlcNAc孵育后，有78%转化为最终的糖蛋白，产物在生理pH下稳定。作者也尝试了多种还原糖的连接，如N-乙酰化氨基单糖、常规己糖、戊糖、二糖、三糖等，均可得到糖基化产物。
作者试图合成天然N-GlcNAc糖蛋白的类似物，作者表达了Asn45位突变为BnD的IL-17A蛋白，再依次与肼和GlcNAc反应，最终得到糖基化产物。此糖基化的发生对蛋白造成的热稳定性的提升某种程度上与天然IL-17A发生糖基化后热稳定性的提升类似。作者也测试了合成的N-GlcNAc能否发生内切糖苷酶催化的糖基化转移反应，结果发现在泛素衍生物上能将N-GlcNAc取代为更大的糖链。
本文作者：JGG
责任编辑：Guo ZH
原文链接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1002/ange.202116545
文章引用：DOI：10.1002/ange.202116545
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