分享一篇发表在Analytical Chemistry上的文章，文章通讯作者是来自于美国俄亥俄州州立大学，化学和生物化学系的Amanda B. Hummon教授。Amanda教授的主要研究方向是，质谱成像、转录组和蛋白质组学样品制备新方法。

脂质作为生命体所必须的化学物质，数千种各具特点的脂质分子组成了生命体中的脂质指纹。脂质含量和组成的异常与诸多病理过程高度相关。然而由于脂质分子一般都具有众多的异构体，因此目前针对脂质分子表征最常使用的方法——质谱，通常需要针对特定脂质进行专门改进，并不普遍可行。

不饱和脂质中双键位置和构型的鉴定，通常借助于衍生化反应实现。而在生命体中广泛发生的脂质过氧化，就是自由基对脂质链上的不饱和碳碳双键进行的反应。这一反应可以在串联质谱中促进脂质的碎裂，进一步对脂质异构体的表征提供辅助信息。借助光敏剂的过氧化衍生已经得到了部分应用。本文作者利用Norharmane这一具有光敏性的MALDI基质，在光照条件下实现了对不饱和脂质的过氧化。这一方法无需额外的样品制备操作，就可以实现对于脂质双键位置异构体的鉴定。

作者首先使用非基质可用的光敏剂Rose Bengal在光照照射下生成脂质过氧化物，再将样品送入质谱检测。结果表明，虽然脂质过氧化物由于其不稳定性难以在通常的MALDI中被检测得到，但是对应的碎片离子却得到了明确的检出。这说明了这一衍生化方法对于质谱检测的兼容性。

作者使用具有光敏性的Norharmane（NHM）作为MALDI基质和不具有光敏性的二羟基苯甲酸（Dihydroxybenzoic acid, DHB）作为基质，对标准物质18:1 (Δ6-cis) PC and 18:1 (Δ9-cis) PC进行了基于CID的MS/MS检测。结果表明只有在使用光敏剂，并且加以光照的情况下，才能够观察到预期的碎片离子的信号。并且这种衍生化在除了神经酰胺、胆固醇、甘油酯以外的其他类型的脂质中都能够发生，并且检测到明确的衍生物信号。

之后作者利用这一方法对小鼠的肺组织切片进行了成像。结果表明该方法能够在复杂样品中进行成像。但是作者指出即使是这样的衍生化策略也可能导致一个碎片离子来自于不同的母离子。作者指出，综合离子淌度分析和MS2的结果提前对脂质链中的双键数目进行区分，有助于进一步的提高异构体分辨的可信度。

总的来说，作者使用具有光敏性的Norharmane作为MALDI的基质并结合光照条件，实现了在无需额外操作的情况下对脂质双键位置异构体的鉴定，并且该方法对于复杂生物样品的质谱成像具有较好的兼容性。

本文作者：YSB

责任编辑：TZS

DOI：10.1038/s41556-025-01610-3

原文链接：https://doi.org/10.1038/s41556-025-01610-3