给大家分享一篇来自Journal of the American Chemical Society的文章，名为“Modular Diazo Compound for the Bioreversible Late-Stage Modification of Proteins”。

为了验证这一策略，作者选择了两种性质反差鲜明的蛋白质：Cyt c，小质量阳离子蛋白质，没有活性Cys残基；GFP，大质量阴离子蛋白质，含有两个活性Cys残基，并使用Q-TOF MS、MALDI-TOF MS或SDS-PAGE来确定标记的程度。

为了验证该组合体的生物可逆性，作者用O-(2甲氧基乙基)乙醇酸（MGA）代表该组合体中的AOCOM（上述的触发自降解）部分，与猪肝酯酶（PLE）和生物亲核试剂（还原性谷胱甘肽GSH）进行共孵育，并使用LC-MS进行检测，数据表明猪肝酯酶可以无痕的降解MGA。使用PLE对Cyt c-1-cR10和GFP-1-TAT进行处理也得到了形同的效果。

最后作者用荧光素标记的Cyt c-1-cR10处理HeLa和黑色素瘤细胞，并使用活细胞荧光成像观察，发现cR10修饰的偶联物在2.5h内被内化到细胞质中，而为发生酯化修饰的则没有穿过细胞膜。