给大家介绍一篇来自“Angewandte Chemie International Edition”的文章，题名为“A Proximity-Induced Fluorogenic Reaction Triggered by Antibody–Antigen Interactions with Adjacent Epitopes”。

邻近诱导的化学反应利用其与模板的高亲和力和高选择性相互作用，具有位点特异性且快速的特点。然而，仅由抗体-抗原相互作用诱导的反应尚未开发出来。在此，作者提出了双表位抗原模板化学反应（BATER）作为一种新型模板反应。

在本研究中，作者设计了BATER，其中单克隆抗体的抗原结合片段（Fabs）与不同的表位相互作用，以增加偶联反应性官能团的局部浓度（图1A）。作者描述了一种基于荧光的方法来跟踪BATER的进展，该方法基于携带两个反应基团的Fab抗体与肿瘤坏死因子受体2（TNFR2）不同表位作为的模型抗原之间的相互作用。只有当两个反应基团非常接近时，才会发生荧光反应（图1B）。

为了可视化BATER的进展，使用了3-叠氮香豆素（AC）和双环酮（BN）之间的无铜点击化学（图2A）。作者开发了一种抗TNFR2的双再生抗体，Bp109-92，它由两种不同的Fab组成，TR92和TR109（图2D）。对制备的Fab蛋白的SDS-PAGE分析，C-末端与反应基团缀合（图2E和F），表明缀合的Fab蛋白质的产率约为50%，这是DBM基团在轻链和重链的两个半胱氨酸残基之间交联的产物。

图1

图2

最后，作者研究了用于BATER的抗体表位的影响。TR92和TR109的表位与TNFα相互作用面在同一侧，而TR96的表位位于相反的面（图3A）。培养TR92-AC1、TR96-BN0和TNFR2-MBP，并通过SEC进行分析（图3B）。结果表明，选择与相邻表位相互作用的Fab对BATER很重要。

图3

总之，作者成功地观察到，化学反应使用彼此接近的反应性官能团以抗原特异性的方式进行。生物正交官能团与抗体的偶联仅使用四嗪和BN或反环辛炔之间的快速反应进行，并已用于细胞表面抗原的交联和放射性药物的递送（预靶向）。与这些反应相比，叠氮化物和BN之间的反应要慢得多，对于靶抗原分子上的可控反应可能有用。BATER策略适用于其他抗原和生物正交反应，为体内合成抗原上的化合物提供了诊断和治疗的基础。

本文作者：QHJ

责任编辑：FJY

原文链接：https://doi.org/10.1002/anie.202306431

DOI: 10.1002/anie.202306431