抗体偶联药物（ADC）是生物药物研发热点之一，ADC药物生产工艺复杂，质量控制点多，控制难度高。半胱氨酸上的巯基是偶联常用的活性基团，包括链间二硫键还原后半胱氨酸上的巯基，以及定点突变或插入的半胱氨酸上的巯基等。在这些应用中，巯基一般在细胞培养阶段处于氧化状态，以二硫键形式与抗体上的其它半胱氨酸或者与游离半胱氨酸相结合。纯化后的抗体需要经还原、部分氧化、换液等步骤来活化巯基，进而用于后续偶联反应。沈阳药科大学马宁宁课题组发现抗体轻链166位的谷氨酰胺在被突变成半胱氨酸后（Q166C），半胱氨酸上的巯基在细胞培养过程中可以保持活性，经纯化后可直接用于偶联反应，从而简化抗体偶联药物的生产工艺，实现抗体的单步骤定点偶联。

作者将Q166C突变后的贝伐单抗（Ava-166C）通过一个含有马来酰亚胺基团的连接子与一个血管生成素2（Ang2）特异性结合的多肽进行单步骤偶联，得到一个同时结合VEGF和Ang2的双特异性分子（Ava-Plus）。由于VEGF和Ang2都具有促进新生血管生成的作用，同时中和VEGF和Ang2可能会有更强的抑制新生血管生成的效果。首先Q166C突变及之后的多肽偶联没有影响贝伐单抗对VEGF的高亲和力。在体外人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)迁移实验和小鼠人结直肠肿瘤细胞COLO 205异种移植模型中，Ava-Plus显示出比贝伐单抗更强的抑制效果，初步实现了Ava-Plus分子构建的目的，也初步验证了Q166C的成药性。

轻链166位的谷氨酰胺在治疗性抗体上高度保守，Q166C突变具有扩展至其它抗体的潜力。