分享一篇发表在Angew上的文章：A Functional Chemiluminescent Probe for in vivo Imaging of Natural Killer Cell Activity against Tumours. 文章的通讯作者是爱丁堡医学院炎症研究中心的Marc Vendrell教授和Takanori Kitamura教授和来自以色列特拉维夫大学的Doron Shabat教授

      这篇文章的主要内容就是作者开发了一种可以对NK细胞释放的的颗粒酶B进行活体成像的化学探针，其可以有效的在活体内对NK细胞杀伤癌细胞的过程进行成像。

      自然杀伤细胞（NK细胞）是一种可以杀死癌细胞的免疫细胞，因此通过过继疗法把NK细胞输送给肿瘤患者来治疗肿瘤是一种有效的免疫疗法，但是NK细胞在某些情况下无法杀伤杀死肿瘤细胞，因此对NK细胞的活性进行测量有助于我们确定针对不同癌症的最佳疗法。NK细胞杀伤肿瘤的原理是在识别靶细胞之后，NK细胞将颗粒酶释放到靶细胞中，从而诱导细胞凋亡。目前测量活性的金标准是铬释放实验，也就是根据靶细胞裂解后释放的51Cr的含量来判断NK细胞活性，除此之外，流式细胞仪方法也被用在检测NK细胞活性上，但是这些方法分辨率有限，且不能在体内进行检测，因此作者就考虑开发一种化学探针的方法对NK细胞进行体内成像。

      作者选择颗粒酶B作为探针的上游靶点，颗粒酶B是一种丝氨酸蛋白酶，作者设计了和颗粒酶B底物类似的四肽序列，并在末尾连接上发光基团，在四肽与末端发光基团连接时，发光基团的活性丧失，而当这个四肽被颗粒酶B水解后，发光基团被释放，从而在520 nm的波长下产生光信号来进行成像。

      首先作者合成了如图所示的探针，之后将其与颗粒酶B进行孵育后检测单独的探针以及孵育后的探针的信号强度，发现探针可以快速响应颗粒酶B的活性，使用颗粒酶B的抑制剂则可以使信号强度回归基线，之后作者将探针与其他丝氨酸蛋白酶以及细胞内小分子进行孵育，证明了此探针不与其他酶或者分子反应。

      之后作者将探针与癌细胞以及NK细胞共孵育，发现此探针可以有效的在细胞水平对NK细胞的杀伤过程进行成像，最后作者在小鼠层面进行测试，发现在植入肿瘤后，探针可以有效的对小鼠体内NK细胞杀伤肿瘤的过程进行活体成像。证明了此方法的有效性。

      总之作者开发了一种可以在体内检测响应了肿瘤细胞的NK细胞活性的探针，并证明了其具有活体成像，高分辨率等优点。

本文作者：WXH

原文链接：

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1002/anie.202011429

原文引用：DOI：10.1002/anie.202011429

责任编辑：LZH